等度液相色谱分析仪是一种高效液相色谱仪(HPLC)的类型,它利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对样品中的化合物进行分离和分析。在等度液相色谱中,流动相的组成和比例在分析过程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色谱分析仪的工作原理基于样品分子在固定相和流动相之间的分配和吸附作用。样品溶液被注入色谱柱后,样品中的各组分与固定相发生相互作用。由于各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,它们在色谱柱中的移动速度也会不同,从而实现组分的分离。分离后的组分依次进入检测器,检测器将样品组分的信号转换为电信号,经过数据处理系统记录和分析,最终生成分析报告。
等度液相色谱分析仪的组成部分:
一、流动相供给单元
溶剂储液瓶
存放纯水、甲醇、乙腈、缓冲盐等流动相,配瓶盖、吸液管路,需避光、密封防止有机相挥发。
吸液过滤头(砂芯滤头)
浸泡在溶剂内,拦截流动相中微小杂质,防止堵塞泵头单向阀,长期使用易积垢需定期超声清洗。
在线脱气装置(脱气机)
真空脱气,除去流动相中溶解气泡,避免压力波动、基线毛刺、出峰异常;小型简易机型可省略,依靠超声手动脱气。
管路(PTFE/PEEK毛细管)
连接储液瓶到泵头,耐腐蚀,输送流动相。
二、高压恒流输液泵(等度核心部件)
等度为单泵单流路,不需要梯度混合阀、多元比例阀,结构比梯度泵简单。
泵头组件
包含泵腔、柱塞杆、柱塞密封圈、进出口单向阀;电机驱动柱塞往复运动,提供稳定高压恒流输送。
压力传感器
实时监测系统压力,超压自动报警、停机,保护色谱柱与管路。
purge冲洗阀
大流速快速排出泵内气泡,日常排气、清洗泵头使用。
流量调节模块
设置0.001–10 mL/min恒定流速,全程配比不变,即“等度”含义。
压力阻尼器
削弱柱塞往复带来的流量脉动,稳定基线与压力。
三、进样单元(样品引入模块)
分手动六通进样阀、自动进样器两种配置,二选一:
1.手动六通进样阀
定量环:固定体积(5/10/20/50/100μL),精准定量样品;
阀体转子密封、进样针;分载样、进样两个档位。
2.全自动进样器(高配机型)
样品盘、样品瓶、取样进样针;
清洗管路、清洗溶剂瓶,自动润洗针、定量、进样;
可选温控功能,防止易降解样品变质。
四、色谱分离单元
保护柱
串联在分析柱前端,拦截样品强保留杂质、颗粒物,保护昂贵分析色谱柱,内部含短填料与筛板。
分析色谱柱
实现不同组分分离,根据检测需求选用C18、C8、硅胶、离子交换等填料柱。
柱温箱
恒温控制色谱柱温度(20–60℃可调),消除室温波动,保证保留时间、峰面积重复性;低温检测可配制冷型柱温箱。
连接PEEK管路、接头
短细管路,降低死体积,避免峰展宽。
五、检测器(信号检测核心)
等度液相常用紫外可见检测器(UV-Vis),部分配套示差折光、荧光检测器:
紫外检测器(主流)
氘灯光源、分光光栅、流通池、光电接收元件;
流通池:流动相携带样品通过,吸收紫外光产生电信号;
波长可调,单波长恒定检测。
可选配套检测器
示差折光检测器(RI):通用型,无紫外吸收样品检测;
荧光检测器(FLD):痕量高灵敏度分析。
六、数据采集与控制系统
信号采集板
将检测器光信号转化为电信号传输至工作站。
主机控制面板/触摸屏
设置流速、压力上限、柱温、检测波长、运行时间等参数。
色谱工作站软件
电脑端配套软件:实时采集色谱图、自动积分峰面积、计算浓度、保存图谱数据、输出检测报告。
七、辅助配套配件
过滤装置:溶剂过滤器、0.45μm水系/有机系滤膜,流动相上机前过滤;
超声清洗机:流动相脱气、清洗滤头、单向阀、进样针;
废液收集桶:承接检测器流出废液;
扳手、备用密封垫、备用定量环、保护柱芯等耗材备件。