等度液相色谱分析仪是一种高效液相色谱仪(HPLC)的类型,它利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对样品中的化合物进行分离和分析。在等度液相色谱中,流动相的组成和比例在分析过程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色谱分析仪的工作原理基于样品分子在固定相和流动相之间的分配和吸附作用。样品溶液被注入色谱柱后,样品中的各组分与固定相发生相互作用。由于各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,它们在色谱柱中的移动速度也会不同,从而实现组分的分离。分离后的组分依次进入检测器,检测器将样品组分的信号转换为电信号,经过数据处理系统记录和分析,最终生成分析报告。
等度液相色谱分析仪的标准操作步骤:
一、操作前准备
检查仪器电源、线路、废液瓶是否完好,废液及时清空
配制等度单1流动相,经滤膜过滤、超声脱气15-20分钟
检查色谱柱连接无误,确认柱流向正确,拧紧接头
准备待测样品,样品过滤除杂,备好标准对照品
二、开机预热
依次打开主机电源、高压泵、检测器、电脑工作站
开启检测器光源,预热30分钟,稳定基线
设置仪器环境温度,稳定实验室环境
三、流动相平衡
将吸液头放入流动相瓶内,排尽管路气泡
设置合适流速、柱温、检测波长
开启高压泵,以设定流速冲洗平衡色谱柱
持续走基线,直至基线平稳无漂移
四、标准品测定
用进样针吸取标准溶液,润洗进样阀3-5次
准确进样,启动工作站开始采集数据
记录标准品出峰时间、峰面积,建立标准参照
五、样品检测
润洗进样阀后注入待测样品
点击开始运行,自动完成样品分离检测
同一批次样品连续测定,做好编号记录
观察出峰状态,异常及时停机调整
六、数据处理
检测完成保存图谱与实验数据
对照标准曲线计算样品含量、浓度
核对数据无误,导出打印检测报告
七、关机清洗流程
样品全部测完后,先用纯水冲洗含盐流动相管路
更换甲醇/乙腈有机相,低流速冲洗色谱柱及整个流路
冲洗干净后,依次关闭高压泵、检测器光源
关闭仪器主机、电脑电源
整理进样针、器皿,清理操作台,做好使用记录