等度液相色谱分析仪是一种高效液相色谱仪(HPLC)的类型,它利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对样品中的化合物进行分离和分析。在等度液相色谱中,流动相的组成和比例在分析过程中保持恒定,因此得名“等度”。
等度液相色谱分析仪的工作原理基于样品分子在固定相和流动相之间的分配和吸附作用。样品溶液被注入色谱柱后,样品中的各组分与固定相发生相互作用。由于各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,它们在色谱柱中的移动速度也会不同,从而实现组分的分离。分离后的组分依次进入检测器,检测器将样品组分的信号转换为电信号,经过数据处理系统记录和分析,最终生成分析报告。
1、高压输液系统:
组成:包括贮液器、高压泵、过滤器及脱气装置。
功能:
贮液器:存储高纯度溶剂(流动相),需采用耐腐蚀、对溶剂呈惰性的材料制成,并配备过滤器防止颗粒进入泵内。
高压泵:作为驱动溶剂和样品通过色谱柱及检测系统的高压源,其性能直接影响分析结果的可靠性。
脱气装置:防止流动相中的气泡进入检测器,避免噪声增加或检测异常。等度分析中,流动相组成恒定,但脱气仍为必要步骤以确保基线稳定。
2、进样系统:
组成:常用高压六通进样阀或自动进样器。
功能:将样品准确、定量地引入流动相,要求密封性良好、死体积小、重复性好,且对色谱系统的压力和流量波动影响小。等度分析中,进样量恒定有助于提高分析重复性。
3、分离系统:
组成:核心为色谱柱,通常由优质不锈钢制成,内装填料(固定相)。
功能:
色谱柱:利用固定相与样品中各组分的相互作用差异(如分配系数、吸附能力)实现分离。等度分析中,流动相组成恒定,分离效果主要取决于色谱柱的选择性和柱效。
保护柱:常配备于分析柱前,防止污染和堵塞,延长分析柱寿命。
4、检测系统:
组成:常见检测器包括紫外吸收检测器、荧光检测器、示差折光检测器等。
功能:将柱流出物中的样品组成和含量变化转化为可检测信号(如电信号)。等度分析中,检测器需具备高灵敏度和稳定性,以准确检测微量组分。
5、数据处理系统:
组成:现代液相色谱仪通常配备色谱工作站或计算机软件。
功能:
数据采集与存储:实时记录检测器输出的电信号。
数据处理与分析:生成色谱图,计算峰面积、保留时间等参数,实现定量和定性分析。等度分析中,数据处理系统可简化复杂样品的分析过程,提高分析效率。
