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制备色谱填充柱方法
时间:2012-08-20 点击次数:1759

 制备填充柱操作步骤:

1)把空柱竖直架在滴定架上,两端向上,夹紧。

2)色谱柱有两种,一种是两端一样长的,另一种是两端一长一短的,两端一样长的在填充时不分方向,而两端一长一短的则有方向性,长的一端接进样口,短的一端接检测器;装柱前要将小三角漏斗接在进样口的一端;用10cm长的软橡胶管将柱和漏斗套在一起,注意要套得紧一些,以免加入载体时会外泄。

3)将玻璃棉捏成2cm长的一条(不用捏的太小),塞入空柱接检测器一端,深度为5-10cm

4)把约50cm长的硅橡胶管(普通橡胶管也行,但效果略差)一头接在抽气机上(套上一层纱布以防止填料被抽入抽气机内),另一头挡在空柱接检测器一端。

5)在小漏斗里加入少许填料(1-2mL),用橡胶棒轻轻敲击空柱使载体落入柱管中,开动抽气机1-2s再关闭,使这少许载体快速到达玻璃棉部位并形成有效阻塞。

6)一边持续开动抽气机,一边在漏斗里加入填料,并慢慢敲击柱的不同位置,使填料尽量紧密;基本填满时仔细敲击柱,填料紧缩一点就再加入一点,直至再无法紧密为止;如果是玻璃珠,zui后填满的位置可以和检测器端的玻璃棉位置相平,如果是不锈钢柱,则两端都填满至端口。

7)拔掉进样口端的小漏斗,加入一条玻璃棉,塞紧。

8)如果是玻璃柱,要先在两端各套上一个胶圈,防止螺母落下时打碎柱。

9)在柱上做标记后(推荐挂金属小牌),装入柱温箱中老化。

注意事项:如果是玻璃柱,在操作中要小心折断。但是玻璃柱由于是透明的,可以看到填充效果;不锈钢柱虽然不会折断,可是在填充时看不到效果,只能凭经验填满为止。涂固定液时应当注意涂渍均匀,要经常搅动溶液但要轻巧,不要损坏载体。老化时要注意保持低的载气流速,逐渐升温,老化要充分,这样才能达到较好的柱效。

 

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